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[求救] 請問Tris-Glycine與Bis-Tris系統

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最新2023-07-22 12:59:00
留言20則留言,5人參與討論
推噓3 ( 3017 )
各位先進好 個人之前腦波弱買了廠商建議的預鑄Bis-Tris膠,那時候不知道Bis-Tris系統跟原本的Tr is-Glycine差很多,所以跑膠是用Bis-Tris跑,transfer還是用原本的Tris-Glycine+20% Methanol buffer,就這樣也跑了好一陣子… 今天問廠商其它的問題時,她說跑膠跟Transfer的系統要一樣才行…請問假如兩個不一樣 ,會造成結果很大的誤差嗎?真的是好擔心之前做的要丟垃圾桶了… -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 220.132.117.37 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1689695077.A.12E.html

20 則留言

xxtomnyxx, 1F
呃.....你可以問問看廠商跑膠和transfer系統不一樣會

xxtomnyxx, 2F
有什麼問題。然後你仔細想一想,你總有跑marker吧?pr

xxtomnyxx, 3F
otein也該有定量過吧?然後你western blotting有任何

xxtomnyxx, 4F
異常嗎?

xxtomnyxx, 5F
你如果有搞懂整個SDS-PAGE是怎麼運作的,廠商講錯的時

xxtomnyxx, 6F
候就不會被唬的一愣一愣的了,而且很多業務其實只管賣

xxtomnyxx, 7F
,他們自己也許根本也不懂他們的產品是如何運作的。It

xxtomnyxx, 8F
just works! Magic!

vagus0620, 9F
聽到她這樣說的時候我也是很疑惑,畢竟marker也有過去

vagus0620, 10F
,actin什麼的也看起來頗正常。但是自從昨天知道marker

vagus0620, 11F
在兩種buffer中高分子量會跑得不一樣真的很震驚…我用t

vagus0620, 12F
ris-glycine跑非常多年了,說真的她建議我買Bis-Tris

vagus0620, 13F
膠的時候我真的沒仔細了解它們的差異

jsi, 14F
參照marker說明書在兩個系統分別標示的對照分子量即可。

xxtomnyxx, 15F
Marker 在不同 PAGE 中是會因為 pH 不同等等因素,跑出

xxtomnyxx, 16F
不同的樣子,而且 marker 本來就只是"參考",跑起來不

xxtomnyxx, 17F
一樣也不會影響結果

tynse71864, 18F
我同版主這樣做欸 其實轉的過去都還好

greenmoon00, 19F
marker算是相對比較 反正這個高度的就是這個分子量

greenmoon00, 20F
除非根本跑不開